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细胞培养

提供来源:上海百贺 日期:2023年01月03日

取您所需,利用徕卡显微系统的细胞和组织培养倒置显微镜提高活细胞成像工作流程中的效率。

这些使用简便的显微镜允许您根据自身需求配置相应的成像解决方案,可搭载灵活多样的聚光镜选件和数字成像记录功能,从未为您的实验室打造恰到好处的解决方案。

徕卡细胞培养显微镜系统特性:

操作简便,所需的培训和维护量很小,以便您将精力都集中在研究工作上

冷光源 LED 照明在所有光亮度级别下提供恒定的色温

简易荧光装置 (选配) 可轻松呈现您的荧光标记

高清成像 (选配) - 将高清摄像头直接连接到显示器或 PC;提供高质量的可发表图像        

灵活的工作距离,较高可达 80 mm,可容纳载玻片、petri 培养皿、多孔板和较高的培养瓶

细胞工厂解决方案可容纳较高 400 mm 的器皿

 

细胞分类

细胞外形

实验室培育的动物细胞可根据多项标准进行区分:

显微镜下可以轻松地识别其形态。成纤维样细胞为双很或多很细长形状,而上皮样细胞呈多边形。与上面两种细胞不同的是,淋巴母细胞样细胞并非贴壁生长,而是悬浮生长。

细胞的类型可细分为永生细胞、原代细胞和干细胞。

细胞组织形式可谓丰富多样,从简单的二维单层培养细胞到二维共培养细胞,再到三维球状细胞团和类器官

Fibroblast-like cells, epithelial-like cells and lymphoblast-like cells (from left to right).

 

名称

形态学

来源

COS

成纤维细胞样

非洲绿猴

HEK 293

上皮样

人类

CHO

上皮样

仓鼠

MDCK

上皮样

HeLa 细胞

成纤维细胞样

人类

Jurkat

淋巴母细胞样

人类

 

将细胞系用于细胞培养的一些实例。

细胞培养材料

如何培养细胞

动物细胞在各类不同的器皿中培养,涵盖用于基础研究的小型微流体装置、用于筛选目的的 96 孔板乃至用于大规模药物生产的细胞培养瓶和细胞工厂。

鉴于其一次性使用特点,多数容器使用塑料制成。其它器皿则专为显微镜应用优化设计,因此具有玻璃底。

动物细胞培养基包含:

  • 能量来源
  • 氨基酸
  • 维生素
  • 以及盐类

此外,它还包含缓冲系统和 pH 值指示剂,用于检查 pH 值是否平衡。

细胞培养维护

您的日常工作内容是什么?

由于细胞会消耗培养基中的成分,定期补充培养基。在这种情况下,细胞培养过程中应进行目视检查,以观察汇合程度和健康度并检测潜在的微生物污染。

永生细胞系的一个特征就是无限增殖。因此,它们时不时进行分裂 (传代) 并转移至单独的培养器皿中。

通常,培养的细胞在用于实验前就进行了基因改造。例如,借助 转染操作,研究人员为所需要的蛋白质添加 荧光标记 ,以便通过显微镜将其可视化。

MDCK cells in different confluence stadiums.

显微镜 – 基本要求

我需要哪种工具?

为管理细胞培养实验室的日常工作,显微镜是一件必需品。此类显微镜须具备倒置配置。倒置显微镜采用“物镜位于样品下方,聚光镜位于样品上方”的设计,这样就能使物镜尽量贴近细胞,并在上方保持较大的工作距离。

由于动物细胞的固有反差很低,细胞培养显微镜提供诸如相差等反差观察法。DIC (微分干涉相差) 在这里无法发挥作用,因为该技术无法配合塑料器皿用于细胞培养。DIC 有一个很好的替代方案,那就是 IMC (整合调制相差),该技术不仅能搭配塑料容器使用,而且无需借助专用物镜或棱镜。此外,细胞培养显微镜应易于操控,以避免浪费时间。 

徕卡细胞培养显微镜具备良好的易用性,并可针对个性化需求提供灵活多样的反差观察方法。

显微镜 – 高级要求

我需要哪种工具?

一种很常见的细胞生物学科研手段是使用荧光标记转染细胞,以便使用研究型显微镜进行后续研究。如果您使用荧光蛋白,您的细胞培养显微镜还需要配备荧光选件,以用于控制转染效率。

为实现重要的记录和标准化目的,显微镜应配备数字摄像头,至好能够记录和梳理拍摄的数据。

由于细胞培养实验室都存在空间问题,细胞培养显微镜的尺寸不宜过大,例如,至好能安装在超净台中。此外,至新趋势都要求显微镜设计得足够小巧和稳固,以便在培养箱内部使用。

Neuronal cells in brightfield, phase contrast and fluorescence microscopy (from left to right)

 

明场

相差

微分干涉相差 (DIC)

整合调制相差 (IMC)

荧光

放大倍率

工作距离

摄像头

Leica DM IL LED

+

+

-

+

+

PH:5x 至 63x

IMC:10x、20x、32x、40x

40 mm、80 mm

+ (自由选择)

Leica DMi1

+

+

-

-

-

10x、20x、40x

40 mm、50 mm、80 mm

+ (集成式)

 

用于大批量生产应用的显微镜

生产生物材料 (例如蛋白质、疫苗或抗体) 需要在大型器皿中培养细胞。

为应对这一要求,相关的细胞培养显微镜须具备较大的工作距离和视场。此外,它需要具备很高的稳定性,以便牢固地承载大型器皿乃至大量器皿。 

Leica DM IL LED 可使用超长透射光照明臂进行配置,以便您自由调节细胞培养器皿所需要的工作距离,高度至高可达 40 cm。

细胞检测

活细胞应用

细胞培养是一个动态过程。与其它任何生物系统一样,细胞的生长和行为有时难以预测。因此,长期监测比仅仅在单个时间点检查细胞培养过程更具优势。

而这正是显微镜能够一展所长的地方,您可将其放置在培养箱中,以便不间断地监测细胞。例如,借助这一特性,您可随时随地检查细胞培养的汇合程度。 

           

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