您是否遇到这些难题？
固定组织（PFA）无法提取高质量RNA？
样本异质性强，结果不准确、不可靠？
单细胞/空间转录组成本高、分辨率受限？
珍贵病理样本有限，不足够开展多个实验？
例如在肝脏等复杂组织研究中提取RNA分析面临以下挑战：
组织异质性严重：肝脏包含肝细胞、胆管上皮、免疫细胞等，传统整体提取难以反映真实表达差异
空间信息丢失：单细胞测序需组织解离，破坏细胞原位信息
技术方案受限：空间转录组：图像分辨率或通量受限；传统 LCM（Laser Capture Microdissection，激光捕获显微切割）大多使用新鲜样本，无法利用大量病理固定组织
病理固定组织RNA难以提取，降解快，缺乏标准化流程
临床样本珍贵：无法转化为高质量和足够的RNA分析数据。
激光显微切割，即LMD（Laser Microdissection）技术，精准从组织切片中分离目标单细胞 / 特定组织区域，适配后续核酸提取测序。南方医科大学汪艳教授团队发表于Journal of Visualized Experiments的工作中，第一作者曾伟兰博士作为方法学核心执行人，依托学校科研支持中心（中心实验室）平台及该平台配备的徕卡LMD激光显微切割系统，成功构建了一套从固定组织到RNA测序的标准化解决方案，实现精准到单细胞级别分选，兼容PFA固定+冰冻切片样本，5天内完成从取材到测序建库，1000个细胞即可获得高质量RNA分析结果的实践方案。该方案提供了一套完整可重复的标准化实验流程：样本制备 → LMD 精准切割 → RNA提取 → qPCR / RNA-seq。
真正实现：固定组织 → 精准分选 → 高通量分子分析
关键技术突破
01 固定组织RNA提取优化
控制PFA固定时间24h，避免蛋白-核酸过度交联不可逆损伤RNA
优化解交联 + 蛋白酶K消化体系，提高RNA释放效率
RNase全流程控制，保障RNA稳定性
02 高效LMD取样策略
快速苏木素染色替代复杂免疫染色
单张切片30–60min内完成切割，全部切割4h内结束，高效完成目标采集
精准圈选目标细胞群，避免污染
03 微量样本高质量输出
1000 cells → \~110 ng RNA
A260/A280：1.9–2.1
文库片段：300–500 bp（符合测序要求）
该方案从临床到科研全面释放样本价值：
肝病机制研究（MASH、肝损伤、纤维化等）
特定细胞群表达谱分析
微环境与免疫细胞研究
固定病理样本回顾性研究
为什么选择徕卡LMD激光显微切割系统
高精度激光切割，细胞级分辨率
参数可控，适配不同组织类型
可在空间背景下通过可视化控制，实现纯净、无接触、无污染的样本采集
具备高通量处理能力，适应下游质谱等分析需求
样本采集使用标准耗材，通用方便
LMD激光显微切割系统不仅是一台激光显微切割显微镜，更是一套完整DVP解决方案，将细胞显微结构与分子连接，打开病理样本高价值再利用的可能。
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