大家好!这一期我们介绍一个离子色谱神器——抑制器。
首先下面的两张图,分别有“大”字和“人”字,屏幕前的你可以找出两张图中的“人”字的个数吗?
显然,对于拥有足够大的屏幕的你肯定都可以数对,左右两图里面都有11个“人”字。
同学们在数的过程中,是否觉得右图更容易地分辨出“人”?因为作为干扰字体,“大”字的数量明显少了,造成视觉上的扰乱作用大大减弱了。离子色谱中的抑制器,也是通过这种去除背景干扰的离子,保留目标离子,让检测器更容易把它“认”出来。
抑制器
抑制器在离子色谱中充当非常重要的角色,以岛津阴离子抑制器AS-1000型号为例,它长这样:
抑制器为什么叫抑制器,到底是怎么回事呢?上图
如图,在离子色谱中,流动相(洗脱液)一般为KOH(或者Na2CO3/NaHCO3缓冲盐),进样之前仪器处于平衡系统阶段,此时流动相含大量的KOH,即K+和OH-离子,其电导极高。流经抑制器后,抑制器把K+离子转化成H+离子,之后H+离子与OH-离子结合生成弱电导率的H2O,大大降低了流动相的电导。也就是流动相中的KOH通过抑制器后“消失”了!!!它把溶液中的总离子数量降低,对溶液的电导性能起抑制作用。
进样后(样品是NaCl),目标离子Cl-从色谱柱中洗脱出来,和流动相仪器流入抑制器,馏分中的K+离子、Na+离子转化成H+离子,之后H+离子与OH-离子结合生成弱电导率的H2O。然而,字体要加粗了!H+离子和Cl-离子稳定地共存在于溶液当中,其电导明显高于进样前的电导,这个差别就是Cl-离子的响应值了!
那么抑制器的原理是怎样的呢?接下来是干货。
如下图,左右两侧分布正负电极,靠近中间左右两侧分布两个交换膜。电极与交换膜之间充满废液(废液是从电导检测器出口管不断流出),交换膜之间是色谱柱流出的馏分,交换膜将废液与馏分成功隔离。
正负电极两端对水进行电解,正极产生氧气以及H+离子,负极产生氢气以及OH-离子;馏分中的离子在电场的作用下,阳离子(如样品的Na+离子、洗脱液的K+离子)往右边的负极移动,穿过交换膜,走向负极,由于馏分的正离子减少促使正极中的H+离子透过交换膜向馏分内迁移。迁移到馏分中的H+离子与OH-离子结合,生成弱电导率的水,大大降低了馏分的导电能力。
抑制器使用注意事项
通过上述的讲解,我们可以知道抑制器是离子色谱里的重要的部分,能不能测的出来还得靠它!所以平时使用维护好。
1.使用前(放置两周以上重新使用):用0.2ml/min的超纯水冲洗过夜(或灌满静置过夜),使交换膜充分溶胀。之后更换流动相正常使用;
2.平时使用前:用0.2ml/min的超纯水冲洗30min后更换流动相正常使用;
3.抑制器的废液管:抑制器背压不能大于0.4Mpa,故推荐使用标配的废液管;
4.如何判断抑制器是否正常工作:①CDD检测器的BG值降到50以下;②抑制器的废液管可看到有不断的气泡产生
5.关于抑制电流:电流值得设定是根据流动相种类、浓度、流量设定(流量x浓度x系数)。电流过高会产生大量气泡,造成内部压力过大,损坏交换膜;电流过低,抑制流动相电导的效果会变低,仪器的灵敏度降低
6.关于清洗保存:使用完毕后,关闭电源(一定要记得关闭电源),用1ml/min水冲洗去残留的流动相(30min以上)。之后卸下,拧上密封螺母保存。长期不用时,每2周替换里面的水,以免长菌破坏交换膜。
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